Conservação de fungos para manutenção de uma micoteca com potencial aplicação na biotransformação do inseticida Thiamethoxam

Bruna Henrique Sacramento; Juliana Feijó de Souza Daniel

doi:10.20906/CPS/SICITE2015-0986

Resumo

Introdução: A construção de uma micoteca permite a utilização imediata de fungos para testes antimicrobianos, antitumorais, e ainda, ensaios de biotransformação. Esse último consiste na mudança da estrutura de uma molécula catalisada por reações enzimáticas. Os objetivos do presente trabalho foram conservar uma micoteca de entomopatogênicos na UTFPR-LD e purificar o inseticida thiamethoxam a partir do produto comercial Actara® (Syngenta). Metodologia: Os isolados foram conservados em tubos de ensaio e placas de Petri com meio BDA a 25°C por 7 dias, e depois acondicionados em geladeira a 4°C. Preservou-se os fungos, também, em água destilada estéril (Castellani) em temperatura ambiente, garantindo a viabilidade dos fungos por até 2 anos. Para os experimentos de purificação, extraiu-se o inseticida thiamethoxam do produto comercial com diclorometano. Posteriormente, amostras foram submetidas a cromatografia em coluna de sílica gel com eluente diclorometano 1% metanol. Com essas amostras, fez-se a cromatografia em camada delgada e determinação de ponto de fusão. Resultados: Da micoteca da UTFPR-LD foram conservadas 139 placas de Petri, 123 tubos de ensaio e 100 Castellani com fungos, sendo que o tempo restrito de algumas placas de Petri reforça a importância da conservação em Castellani. Sobre os experimentos de purificação, a cromatografia em camada delgada apontou a presença de poucas substâncias e, o ponto de fusão médio das amostras foi de 134°C, diferente do presente na literatura (139,1°C), apontando a presença de impurezas ou umidade. Logo, purificou-se o thiamethoxam novamente em coluna e obteve-se 266,5mg da substância. Conclusão: A criação de uma micoteca permitiu a caracterização e conservação de fungos para diversas aplicações, como testes de biotransformação de inseticidas químicos. Foram obtidos 266,5mg de thiamethoxam até o momento pela purificação com coluna de sílica gel que deve continuar para permitir futuros testes de biotransformação.

Palavras-chave: micoteca; manutenção; biotransformação; thiamethoxam; purificação; cromatografia