MODIFICAÇÕES NOS PADRÕES DE METILAÇÃO DO DNA DO FEIJOEIRO EM RESPOSTA À SECA

Kamila Katieli Kovali; Taciane Finatto; Cristiane Conterno Dipp

doi:10.20906/CPS/SICITE2015-0740

Resumo

Fatores ambientais, como o estresse hídrico proveniente de veranicos ou anos atípicos são responsáveis por grandes perdas de produção. Em resposta às modificações no ambiente, as plantas desencadeiam cascatas de sinalizações e mudanças em padrões de controle epigenético que podem ser herdados. Um exemplo disto é a metilação do DNA (ilhas CpG), que podem ser identificadas por enzimas de restrição que são sensíveis à metilação. O objetivo deste trabalho foi identificar a presença de metilação nas sequências de DNA dos promotores e genes relacionados com a tolerância à seca em duas cultivares de feijão submetidas ao déficit hídrico no florescimento. O experimento foi conduzido em casa de vegetação com duas cultivares de feijão comum mantendo-as irrigadas por gotejamento até o estádio de R6 quando foi suprimida a irrigação até o potencial hídrico no xilema alcançar -1,0 MPa, antes da re-hidratação procedeu-se a coleta das folhas das plantas nessas condições e de plantas que ainda estavam sob irrigação, das folhas coletadas extraiu-se DNA com o objetivo de identificar a ocorrência de metilação. O DNA foi digerido com a enzima HpyCH4IV e em seguida amplificado por PCR utilizando sete pares de primers que flanqueiam o sítio de restrição da enzima em sequencias de DNA gênicas ou promotoras. Quando o DNA está metilado a enzima não reconhece o sitio de restrição e o DNA é amplificado normalmente. Na cultivar IPR Tuiuiú não foi observado um padrão e os resultados foram inconclusivos. Por outro lado, para a cultivar ANFC9, as sequencias de DNA dos locos Phvul.005G126300 e Phvul.002G275000, que correspondem aos fatores de transcrição com domínio AP2 e NAM mostram variação no padrão de metilação em resposta ao déficit hídrico no florescimento para a cultivar ANFC9.

Palavras-chave: Epigenética; Silenciamento de genes; Ilhas CpG; Estresse hídrico; Phaseolus vulgaris L.